Der Ort befindet sich im Osten von Niedersachsen, unmittelbar an der Landesgrenze zu Sachsen-Anhalt und damit der früheren innerdeutschen Grenze. Die Landschaft um Mackendorf wird zum Helmstedter Holzland gezählt. Die Landesstraße 647 führt durch den Ort in Richtung Döhren, den nächsten Ort in Sachsen-Anhalt, ein Ortsteil der Stadt Oebisfelde-Weferlingen im Landkreis Börde. Weitere Straßen führen nach Saalsdorf, Querenhorst und Blanken. Buslinien der Braunschweiger Verkehrs-GmbH führen von Mackendorf bis nach Helmstedt und Wolfsburg.
Der Ort wurde 1160 erstmals urkundlich erwähnt, in der ersten Hälfte des 18. Jahrhunderts erfolgte der Bau der heutigen Kirche.
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