La Route Cyclable de l'État 25 commence à l'intersection de la Route 25 de NY, de la Route 25A de NY et de la Route 111 de NY, à un demi-mile à l'est du centre d'affaires de la ville de Smithtown et continue vers le nord-est le long de la Route 25A de NY, puis dévie vers des routes locales à St James, Stony Brook et Setauket, et rejoint brièvement la Route 25A de NY à Setauket. Dans le pittoresque Village de Port Jefferson, la Route Cyclable de l'État de NY 25 se connecte au ferry Port Jefferson-Bridgeport, CT. La Route Cyclable de l'État de NY 25 continue vers l'est depuis Port Jefferson en suivant des routes locales sur six miles avant de rejoindre à nouveau la Route 25A de NY à Sound Beach. En allant vers l'est depuis Sound Beach, la Route Cyclable de l'État de NY 25 reste sur la Route 25A de NY en suivant une piste cyclable désignée jusqu'à ce qu'elle se fusionne avec la Route 25 de NY à Calverton. La Route Cyclable de l'État de NY 25 reste sur la Route 25 de NY presque tout le long jusqu'à Orient Point sauf pour une section sur des routes locales dans la ville de Riverhead et le village de Greenport.