De State Bike Route 25 begint bij de kruising van NY Route 25, NY Route 25A en NY Route 111, een halve mijl ten oosten van het centrale zakelijke district van de stad Smithtown, en gaat verder naar het noordoosten langs NY Route 25A en vervolgens af naar lokale wegen in St James, Stony Brook en Setauket, en voegt zich kort weer bij NY Route 25A in Setauket. In het pittoreske dorp Port Jefferson, verbindt NY State Bike Route 25 met de veerboot Port Jefferson-Bridgeport, CT. NY Route 25 State Bike Route 25 gaat verder naar het oosten vanuit Port Jefferson langs lokale wegen voor zes mijl voordat het zich weer aansluit bij NY Route 25A in Sound Beach. Gaande naar het oosten vanuit Sound Beach, blijft de NY 25 State Bike Route op NY Route 25A en volgt een aangewezen fietspad totdat het samenkomt met NY 25 in Calverton. De NY 25 State Bike Route blijft het grootste deel van de weg op NY Route 25 richting Orient Point, behalve voor een stuk op lokale wegen in de stad Riverhead en het dorp Greenport.