Los romanos creían en la antigüedad que la Isola Tiberina se había formado tras la expulsión en 509 a.C. de los tarquinianos, los miembros de la familia de Tarquinio el Soberbio, el último rey etrusco de Roma conocido por su crueldad. La islita habría surgido en el lugar donde la población arrojó las reservas de grano al Tíber. En 293 a.C. se produjo una grave epidemia de peste en Roma. Los libros sibilinos, una colección de oráculos de la antigua Roma que se consultaban, decían que había que trasladar a Esculapio, el dios de la medicina, desde Epidauro. Cuando se disponían a partir con la estatua del dios, este se enroscó en forma de serpiente alrededor del mástil. A la altura de la Isola Tiberina, la serpiente nadó del barco a la isla. Por eso se construyó un templo para Esculapio en ese lugar. La actual iglesia de San Bartolomé se encuentra exactamente en el lugar del antiguo templo del cual no ha quedado nada.
La orilla izquierda del Tíber está conectada con la Isola Tiberina a través del Pons Fabricius. Este puente fue construido en 62 a.C. por Lucio Fabricio. La orilla derecha del Tíber está conectada con la isla a través del Pons Cestius. Este puente fue construido por primera vez en 46 a.C. Se reconstruyó completamente en el siglo XIX.
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